肝脏灌洗液中单个核细胞的抗菌作用研究

摘要：目的：明确肝脏灌洗液中的单个核细胞（MC）的抗菌作用。方法体外实验：收集SD大鼠肝脏灌洗液中的MC细胞并分为两组，一组在培养液中添加白细胞介素（IL）-15，另一组不添加IL-15。将两组细胞分别与铜绿假单胞菌（P. aeruginosa）共培养4 h后收集上清并裂解细胞。以LB平板培养检测裂解液中细菌负荷，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测培养上清中干扰素（IFN）-γ和肿瘤坏死因子（TNF）-α含量。体内实验：将40只SD大鼠自气管注入P. aeruginosa菌液（1×109 CFU/mL）并随机分为4组，每组10只：对照组，生理盐水灌胃；免疫抑制组，他克莫司（FK506）灌胃；MC细胞组，应用FK506后自尾静脉注射MC细胞1.0×108；IL-15预处理MC细胞组，应用FK506后自尾静脉注射IL-15预处理的MC细胞1.0×108。收集各组大鼠肺组织及肺泡灌洗液，以LB平板培养检测肺组织及肺泡灌洗液中的细菌负荷，ELISA、Western blot检测肺泡灌洗液、肺组织中IFN-γ和TNF-α含量。结果与单纯MC细胞比较，IL-15预处理的MC细胞体外抗菌能力显著提高，CFU仅为前者35%，且合成、释放IFN-γ、TNF-α的能力更强。与对照组大鼠比较，免疫抑制组大鼠肺脏内免疫细胞数量减少，肺组织和肺泡灌洗液中的细菌负荷量明显升高，而IFN-γ和TNF-α含量呈下降趋势。输入IL-15预处理MC细胞后可显著提高肺组织内免疫细胞数量，减轻细菌负荷量并增加IFN-γ和TNF-α分泌。结论肝脏灌洗液中的MC细胞具有良好的抗菌活性，在免疫抑制条件下可有效提升机体对机会性致病菌的免疫防御能力。