别嘌醇预处理对大鼠肾脏缺血-再灌注损伤中Bax、Bcl-2及 Caspase-3表达的影响

摘要：目的：探讨别嘌醇预处理对大鼠肾脏缺血-再灌注损伤（IRI）的影响及其机制。方法将24只SD 大鼠随机分为3组：假手术组（S 组）、缺血-再灌注组（IR 组）、别嘌醇预处理组（APC 组），每组8只。手术前2周开始，向 APC 组大鼠腹腔注射别嘌醇[50 mg／（kg·d）]，向 S 组及 IR 组大鼠腹腔注射等容量的生理盐水。预处理完成后 S 组切除右肾，IR 组及 APC 组切除右肾并对左肾进行30 min 缺血-再灌注处理。再灌注后24 h 取血液标本，术后2周取肾脏组织标本。采用全自动生化分析仪检测血尿素氮（BUN）和血清肌酐（Scr）水平。采用丙二醛（MDA）检测试剂盒与超氧化物歧化酶（SOD）活性检测试剂盒分别检测血浆 MDA 与总 SOD活性水平。采用蛋白印迹法检测大鼠肾组织中 Bax、Bcl-2和 Caspase-3的表达水平。光学显微镜（光镜）下观察大鼠肾脏组织病理变化。采用 dUTP 缺口末端标记（TUNEL）染色法检测大鼠肾脏细胞凋亡情况。结果与 S 组比较，IR 组及 APC 组大鼠 BUN、Scr、血浆 MDA 水平均明显升高，血浆 SOD 活性水平均明显降低；与 IR 组比较，APC 组 BUN、Scr、血浆 MDA 水平均明显降低，血浆 SOD 活性水平明显升高（均为 P ＜0.05）。与 S 组比较，IR 组与 APC 组肾组织 Bax 和 Caspase-3蛋白表达量均明显增加，APC 组明显低于 IR 组（均为 P ＜0.05）。与S 组比较，IR 组与 APC 组肾组织 Bcl-2蛋白表达量均明显降低，但 APC 组明显高于 IR 组（均为 P ＜0.05）。光镜下，S 组大鼠肾组织结构完整，形态正常；IR 组肾小管管腔明显扩张，肾小管上皮细胞出现大量坏死，间质水肿明显，其内可见大量淋巴细胞浸润；APC 组肾小管管腔轻度扩张，肾间质未见明显水肿，间质内少量淋巴细胞浸润。TUNEL 染色结果显示，S 组、IR 组和 APC 组的肾脏细胞凋亡率分别为（4.1±1.7）％、（32.8±8.9）％、（12.6±3.4）％（均为 P ＜0.05）。结论别嘌醇预处理可能通过抗氧化作用抑制细胞凋亡，从而减轻大鼠肾脏 IRI，改善肾功能。