体外定向诱导成年大鼠骨髓间充质干细胞向许旺细胞样细胞分化的研究

摘要：目的：探讨体外定向诱导成年大鼠骨髓间充质干细胞（BMSC）向许旺细胞样细胞转化的有效方法。方法分别进行成年大鼠许旺细胞原代培养和 BMSC 分离培养。根据诱导方法不同，分为化学诱导组和共培养诱导组。采用显微镜观察许旺细胞和 BMSC 的生长情况，分别采用免疫荧光化学染色法[检测神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）抗体和 S-100抗体等许旺细胞标志蛋白]和流式细胞术鉴定两种细胞；显微镜下动态观察两组细胞的形态和生长情况；共培养诱导组共培养3 d 后，化学诱导组诱导作用4 h、1 d 后分别采用免疫荧光化学染色的方法评估两组细胞的诱导分化情况。结果化学诱导组诱导后的细胞发生了明显的许旺细胞样细胞形态改变，预诱导4 h 后即出现 GFAP 抗体表达阳性，维持诱导1 d 后，GFAP 抗体阳性表达率为（80.9±3.5）％，S-100抗体阳性表达率为（59.0±1.1）％。诱导2 d 后分化细胞开始出现脱落死亡，3 d 后大部分分化细胞脱落死亡。共培养诱导组共培养3 d 后，被诱导的 BMSC 未出现类似化学诱导组明显的细胞形态改变，GFAP 抗体阳性表达率为（89.8±2.4）％，S-100抗体阳性表达率为（80.9±1.7）％。共培养诱导组 S-100、GFAP 抗体阳性表达率均高于化学诱导组，差异均有统计学意义（均为 P ＜0.01）。结论共培养诱导法不仅对BMSC 向许旺细胞样细胞定向分化具有明确的效果，而且对 BMSC 的存活和增殖均有促进作用，因此该法相对于化学诱导法更加安全和有效。